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朊粒病的微生物学检查法

来源:食品伙伴网 时间:2010-06-04 发布者:admin 收藏本文

在进行病原体的微生物学检查时,可采取患者脑脊液和病变脑组织等,通过染色镜检、免疫组化和免疫印迹等方法检测PrPSC。在处理病变材料时,应防止意外传播。

微生物学检查方法主要包括:

①电子显微镜检查:可观察与朊粒感染性疾病相关的病理特征。

②神经病理学检查:可见海绵样病变稀疏地分布于整个大脑皮层,神经元消失,星状细胞增生,典型病变为融合性海绵状空泡,周围有大量淀粉样斑快,用HE和PAS染色清晰可见。

③免疫学方法简便特异,用于朊粒感染特异性标记PrPSC的检测,病人脑组织经蛋白酶消化去除正常细胞的PrPC后,通过斑点免疫(dotblotmethod)或蛋白免疫印迹检测 PrPSC。取病变神经组织细胞或外周血白细胞;荧光抗体染色也可用于朊粒的定位检查。

④PrP基因检测:测定第20号染色体短臂上的PrP基因序列,可诊断遗传型朊粒感染性疾病。用PCR扩增PrPC全基因,经位点特异性的寡核苷酸探针杂交,筛选出突变基因,再进行序列分析,找出PrPC基因突变的位点。

⑤朊粒的分离:用易感动物接种朊粒可产生典型的海绵状脑病,具有诊断意义,但耗时太长且费用太高。转PrPC基因小鼠对人朊粒敏感,松鼠猴对CJD的易感性最为稳定。在上述众多方法中,仍以病理检查为诊断朊粒感染的常用手段。

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